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肉牛胚胎移植技术是专业的繁殖技术,本养牛基地以中国农科院为技术依托,精选优质肉牛,通过冻精冷配技术为全国肉牛养殖户提供改良肉牛犊,实现良种肉牛的繁育,下面简单介绍下肉牛胚胎移植技术
1、供体牛的选择:
供体牛是指在胚胎移植中,提供胚胎或卵母细胞的母牛。一般选择品种优良、生产性能较高或具有某种遗传特性、体质健康、繁殖机能正常,且年龄在15月龄到10岁左右的母牛为宜。
选择标准:遗传性能优良,营养状况良好,生殖机能正常;具有正常发情周期;卵巢丰满,具有一定的弹性和体积;超排开始时,卵巢上应有发育良好的黄体;无繁殖疾病。
2、母牛超数排卵
超数排卵是胚胎移植的一个重要技术环节。利用正确的超数排卵方法进行超数排卵非常重要。
3、受体牛选择
受体牛是指接受胚胎移植的母牛。一般选用生产性能较低,但体质健康、繁殖机能正常,且与供体牛发情周期同步的母牛作为受体,二者发情周期相差不能超过24小时。
选择要求:受体牛应尽量选择产奶性能相对较差的母牛、杂种母牛或黄牛,只有这样才能体现胚胎移植的优势,加速遗传改良的速度;身体健康,营养状况正常,没有全身或者生殖器官感染,没有寄生虫及传染病;生殖机能正常,发情周期正常,移植时,卵巢上有良好的功能性黄体存在;无繁殖疾病;18-21月龄体重350-400千克的青年牛或繁殖机能正常的成年母牛。
4、采集胚胎
供体牛超排发情后的第7天用2路或3路式采卵管进行非手术采卵。采卵液总量为1000毫升,每侧子宫角各500毫升。
为保证供体牛安静,便于操作,采卵前需注射松灵1-1.5毫升。
先冲超排效果较好的一侧子宫角,后冲另一侧子宫角。
保证无污染操作,采卵管的前部不要用手触摸或碰触阴门外部。
采卵管插入深度要符合技术要求,即气囊要在小弯附近,离子宫角底约10厘米。
气囊的打气量为18-20毫升,冲卵时,进液速度要慢,出液速度应快;先少量进液,再逐步加大进液量,每次进液量范围在30-50毫升,防止冲卵液的丢失。
采卵后,供体牛应肌注氯前列烯醇0.4-0.6毫克,子宫灌注抗生素。
5、胚胎检查
采卵杯的处理:把采卵杯内的回收液在室温18-22℃下静置20-30分钟,然后将上清液通过集卵漏斗慢慢清除,*后集卵杯内剩下30-50毫升回收液,摇动集卵杯将其倒入直径100毫米培养皿内。用PBS液冲洗集卵杯壁2-3次,清洗液倒入集卵漏斗。另一侧子宫角回收液做同样处理。集卵漏斗*后保留的20毫升左右液体倒入另一直径100毫米培养皿中。上述培养皿待镜检。
观察胚胎的透明带是否断裂:细胞是否紧密完整,有无游离细胞;胚胎的透明度是否正常,如变暗,说明细胞可能变性;细胞大小是否一致。
胚胎的分级标准:将胚胎分为A、B、C、D4个等级,其中A、B、C级胚胎为可用胚胎,D级胚胎为不可用胚胎。
6、移植胚胎
一般在发情后第6-8天进行。移植前需要麻醉,常用2%普鲁卡因或多卡因5毫升,在荐椎与**尾椎结合处或**、第二尾椎结合处施行麻醉。将装有胚胎的吸管装入移植枪内,用直肠把握法通过子宫壁将移植枪插入子宫角深部,注入胚胎。
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